במאה השנים האחרונות תרביות תאים הפכו לכלי מחקר נפוץ והכרחי, במיוחד על מנת לשמש תחליפים לניסויים בבעלי חיים.במהלך תקופה ארוכה זו המשטחים עליהם גידלו תאים השתנו והתפתחו בהתאם לצרכי החוקרים.בעבר גידלו תאים על משטחי פיירקס, זכוכית וצלחות פטרי, אך לא מעט מסוגי התאים, במיוחד primary cell cultures,לא נדבקו למשטחי זכוכית ולכן החלו לעבוד עם סליידים מצופים בקולגן, על מנת לשפר את הצמדות התאים למשטח.כדי למצוא משטחים נוספים נוסו משטחי פלסטיק, שרובם היו מפוליסטירן וזאת בשל התכונות האופטיות הטובות שלו וכן מכיון שניתן לבצע סטריליזציה בקרינה מייננת ((irradiation.מצד שני לפוליסטירן חסרון בהיותו מאד הידרופובי ולכן תאים לא נדבקים אליו.
כדי שהתאים ידבקו היה צורך במשטח יותר פולארי לכן הוסיפו חלבוני סרום כמו ויטרונקטין ופיברונקטין. בכל זאת, גידול התאים בדרך זו עדיין היווה בעיה,כשגידלו תאים ללא סרום ולכן החלו להוסיף חלבוני מטריקס חוץ תאי, קולגן, למינין ופיברונקטין וכן פוליסכרידים כמו הפרין סולפט.השתמשו גם ב- poly D Lysine על מנת ליצור מטענים חיוביים על גבי הפוליסטירן שעזר לתאים להצמד, לגדול ולהתמיין במיוחד במדיה ללא סרום.מאוחר יותר פותחו פתרונות מתקדמים יותר ונכתבו פטנטים על גידול תאים עלגבי ממברנות במבנה של אינסרטים.תוכלו להתרשם ממבנה האינסרט ובמיקום הממברנה בתמונה הבאה:
אינסרטים אלו מורכבים ממברנה (מוקפת בפלסטיק), כך שיש דיפוזיה ומעבר של יונים ומקרו-מולקולות בצורה חופשית דרך הפורות שבממברנה,כך שהתאים או הרקמה מקבלים הזנה מהמדיום בתלת מימד, מכל הכיוונים, בדומה למצב הטבעי in vivo. אינסרטים לתרביות תאים הינם כלי חשוב בשימוש בתרביות תאים (במחקר cell biology) ונועדו לשפר את גדילת התאים, הצמדותם והתמיינותם לעומת גידול תאים בפלטות מסורתיות מפלסטיק.כאשר משתמשים בממברנה זו ניתן לגדל תרבית תאים רגילה או למשל לגדל שני סוגי תאים, משני צידי הממברנה (co culture), ולחקור את ההשפעה של שני סוגי התאים, זה על גבי זה ללא מגע פיזי בניהם.
כל הנושא של co culture הוא נושא מעניין בפני עצמו ואדון עליו באחד מהפוסטים הבאים. בפוסט הבא תוכלו לקרוא על אינסרטים שמטרתם הינה גידול תרבית רקמה אורגנוטיפית.אשמח לענות לשאלות,מירב[email protected]
מחברת המאמר, מירב גרבי הינה בוגרת תואר ראשון בביולוגיה B.Sc. ותואר שני M.Sc. בביוכימיה מאוניברסיטת בר אילן.• למירב גרבי ניסיון של 3 שנים בעבודת מחקר במחלקה ל Cellular and Developmental Biology בביה"ס לרפואה New York, Mount Sinai School of Medicine • במסגרת עבודה זו חקרה את ההבדלים בין Fibroblast growth factors -FGFs לבין FGF homologous factors FHFs ע"י השריית מוטציה בחלבונים רקומביננטיים והכנה פרפרטיבית של החלבונים לאנליזה בקריסטלוגרפיה.• למירב מומחיות בשיטות: ביולוגיה מולקולרית, יצירת קונסטרקטים , RT-PCR, PCR טרנספקיות וטרנספורמציות, ביטוי חלבונים בחידקים, מיצוי חלבונים, טיהור חלבונים בקולונות אפיניות להפרין, ניקל וגלוטטיון, פתרון בעיות אגרגציה ופרסיפיטציה של חלבונים, אנליזת חלבונים בשיטת ווסטרן, צביעות קומסי וצביעות כסף של ג'לים, טרנספקציה לתרביות תאים, מבחני MTT לתרביות תאים ועוד.• מ - 2006- מנהלת את תחום מדעי החיים בחברת מרקורי לאחר שבמשך כעשור ניהלה גם את תחום הכרומטוגרפיה • מירב גרבי השתתפה בקורסים והשתלמויות בתחומים: כרומטוגרפיה, מיקרוסקופיה ומדעי החיים בחברת Merck .